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大豆苷元對結扎大鼠冠狀動脈所致損傷的保護作用

[收錄:2011-05-15] [作者:] [服務:論文代寫代發] [字體: ]
內容摘要:                                            作者:葉和楊,胡志蘋,周莉,黃志華,曾靖

                                            作者:葉和楊,胡志蘋,周莉,黃志華,曾靖 本文由教育大論文下載中心www.hhrpin.live整理

【關鍵詞】   大豆

  Protective effect of Daidzein on myocardial ischemia injury in rats

  【Abstract】 AIM: To observe the protective effect of Daidzein on rats whose branch of left anterior descending coronary arteries were ligated. METHODS:  Rats ischemia injury model was established by ligating the branch of left anterior descending coronary artery for a durative course of 120 min. Thirtytwo male rats were randomly divided into 4 groups: sham operation group, model group, highdose (5.0 mg/kg) Daidzein group and lowdose (2.5 mg/kg) Daidzein group. The two Daidzein groups were injected with Daidzein of 1 mL/100 g through sublingual vein 10 min before ischemia injury and saline was given in sham operation group and model group. The leadⅡ ECG was recorded before myocardial ischemia injury, 15 min after ischemia and 30, 60, 90 and 120 min after injection with Daidzein. The ∑ST of lead Ⅱ ECG at each moment mentioned above was analyzed and the Jpoint and Tware of ECG in acute myocardial ischemia model were observed to evaluate the protective effect of Daidzein. The activity of creatine phosphokinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH) in serum, the contents of malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD) in myocardial tissue were observed to evaluate the protective effect of Daidzein. The myocardial infarct size was measured by TTC staining of cardiac muscle cells in another 24 rats (divided into 3 groups: model group, Daidzein 5.0 mg/kg group, Daidzein 2.5 mg/kg group) with myocardial ischemia injury induced by the same methods. RESULTS:  Compared with those in model group, the area of acute myocardial infarction declined, the value of ∑ST reduced and the maximum values of Jpoint and Tware of ECG declined in the 2 Daidzein groups. The activity of LDH and CK in the 2 Daidzein groups was lower than that in the model group. The content of SOD was significantly higher and MDA was markedly lower in the Daidzein groups than those in the model group. All the changes mentioned above showed some dosedependent effect. CONCLUSION:  Daidzein has obvious protective effect on myocardium against ischemia injury caused by ligating the branch of left anterior descending coronary artery.

  【Keywords】 Daidzein; myocardial ischemia; coronary artery ligation; serum enzyme; free radicals

  【摘要】 目的:觀察大豆苷元對結扎大鼠左冠狀動脈前降支損傷的保護作用. 方法:取32只雄性Wister大鼠,隨機分為4組,每組8只,分別為假手術組、缺血模型組、大豆苷元高、低劑量組(5.0,2.5 mg/kg). 于結扎冠狀動脈左前降支前10 min經舌下靜脈注入大豆苷元溶液,缺血模型組及假手術組經舌下靜脈注入等體積生理鹽水. 結扎冠狀動脈左前降支使心肌缺血并持續120 min建立缺血模型. 記錄缺血前、缺血15 min,給藥后30,60,90和120 min Ⅱ導聯ECG,統計各標測點Ⅱ導聯ECG的ST段偏移∑ST、統計各組大鼠心電圖J點和T波上升的最大變化值,評價心肌缺血程度. 實驗結束后心內取血測定血清LDH、CK值;測定心肌組織MDA和SOD值. 另用24只Wister大鼠分缺血模型組、大豆苷元高、低劑量組(5.0,2.5 mg/kg)組,同上述動物模型制作方法,取其心肌作TTC染色測心肌梗死面積. 結果:大豆苷元組與缺血模型組比較,心肌梗死面積明顯縮小,LDH, CK值降低,MDA值減小,SOD值升高,心電圖∑ST值減少,J點和T波的上升的最大值明顯降低,且呈一定劑量依賴性. 結論:大豆苷元對大鼠結扎冠狀動脈的缺血損傷具有保護作用.

  【關鍵詞】 大豆苷元;心肌缺血;冠脈結扎;血清酶;自由基

  0引言

  大豆苷元(Daidzein,DD)系葛根中的主要成份,葛根具有解肌退熱、生津透疹、升陽止瀉的功效[1],其化學成分復雜. 主要有效成分為葛根素和大豆苷元,現已能人工合成. 葛根素的臨床應用非常廣泛,對心腦血管疾病[1-2]、視網膜疾病[3]等具有良好療效;大豆苷元也具有抗心律失常[4]、抑制膽囊收縮[5]、耐缺氧[6]、影響免疫器官[7]等作用.  我們通過實驗觀察大豆苷元對心肌缺血損傷的保護作用.

  1材料和方法

  1.1材料健康雄性Wister大鼠,體質量(220±20)g,由江西省實驗動物中心提供(許可證號0219712,動物合格證號JXA2004118,清潔級). 大豆苷元實驗樣品由沈陽藥科大學植化教研室邱峰博士提供,純度為97%. 實驗前用N二甲基甲酰胺溶解DD、雙蒸水稀釋至所需濃度(3∶7);溶劑對照液含相等量的N二甲基甲酰胺. 紅四氮唑,2,3,5triphenylterazolium chloride(TTC), 中國 醫藥集團上海化學試劑公司;甲醛溶液,南昌洪都試劑化工廠(批號040202);其他試劑均為國產分析純. 超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),GSH,乳酸脫氫酶(LDH),磷酸肌酸激酶(CK)試劑盒均購自南京建成生物工程研究所. Mettler Toledo AG135型光電天平,made in Switzerland;中佳KLC2046型低速冷凍離心機;721分光光度計,上海精密 科學 儀器有限公司;XDH3心電圖機;DH140動物人工呼吸機,浙江醫科大學醫學儀器廠;電熱恒溫浴鍋,湖北黃石醫療器械廠; JNA型天平(上海第二天平儀器廠).

  1.2方法[8-9]取32只雄性Wister大鼠,隨機分為假手術組、缺血模型組、大豆苷元高劑量組(5.0 mg/kg)、大豆苷元低劑量組(2.5 mg/kg), n=8. 用100 g/L水合氯醛(3 mL/kg)腹腔麻醉后,氣管插管. 左側第3~4肋間開胸,剪開心包,暴露心臟,于肺動脈園錐與左心房之中間找出冠狀動脈左前降支,并用圓形無創縫合針6/0絲線置于左冠狀動脈前降支起始部下2 mm處備用. 除假手術組僅穿線不結扎外,其余各組均以0號線立即結扎. 結扎冠狀動脈,以心電圖Ⅱ導聯ST段抬高0.1 mV或T波高聳、心肌顏色變暗紅色為結扎成功的標志,記錄結扎前,結扎15 min,給藥后30,60,90,120 min的Ⅱ導聯心電圖. 于結扎冠狀動脈左前降支前10 min經舌下靜脈注入大豆苷元溶液,缺血模型組及假手術組經舌下靜脈注入等體積生理鹽水. 結扎120 min后實驗結束,左心室心內穿刺取血,分離血清置-20℃冰箱保存侍測,測定血清LDH、CK值;然后迅速取出心臟,并測定心肌組織MDA和SOD值. 操作步驟按南京建成生物工程研究所試劑盒說明書進行. 統計各標測點Ⅱ導聯心電圖的ST段偏移∑ST、統計各組大鼠心電圖J點和T波上升的最大變化值,評價心肌缺血程度. 另取24只Wister大鼠分缺血模型組、大豆苷元高、低劑量組(5.0,2.5 mg/kg)組(n=8),同上述動物模型制作方法進行實驗,取心肌作TTC染色測心肌梗死面積. 實驗結束后取出心臟,用冰生理鹽水洗凈稱質量. 將左心室均勻地橫切成5份,用濾紙吸去表面水份,然后放入1.25  /L的TTC 37℃環境中染色15 min,非梗塞區不變色,梗塞區呈灰白色. 置于40 g/L的甲醛溶液中固定24 h,將梗塞區心肌剪下,用光電天平稱其質量,以梗塞區心肌濕質量占全心肌濕質量的百分比表示心肌梗塞的范圍. 評價大豆苷元組(高、低劑量)對大鼠心肌結扎冠狀動脈損傷的保護作用.

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